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真核表達(dá)載體構(gòu)建(you化)服務(wù)
世聯(lián)博研生命科學(xué)服務(wù)中心提供真核表達(dá)載體構(gòu)建和you化服務(wù)。真核表達(dá)載體不同原核表達(dá)載體,主要是因?yàn)檎婧吮磉_(dá)系統(tǒng)所需元件不同,如啟動(dòng)子,終止子等。真核表達(dá)載體至少要含兩類序列:①原核質(zhì)粒的元件,包括在大腸桿菌中起作用的復(fù)制起始序列、篩選克隆的抗藥性標(biāo)志等,以便獲得足夠數(shù)量的DNA克隆。②在真核宿主細(xì)胞中表達(dá)重組基因所需元件,包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、轉(zhuǎn)錄終止和加poly-A信號(hào)序列、mRNA剪接信號(hào)序列、宿主細(xì)胞中復(fù)制或增殖序列、篩選的標(biāo)志基因、以及供外源基因插入的多個(gè)單一限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)等。 服務(wù)內(nèi)容 1. 真核表達(dá)載體公司提供實(shí)驗(yàn)室常用質(zhì)粒載體(酵母表達(dá)載體,各類細(xì)胞表達(dá)載體),為客戶構(gòu)建包含目的基因的真核表達(dá)載體。 2. 真核表達(dá)載體修飾 (1)啟動(dòng)子及調(diào)控序列you化真核I型、III型啟動(dòng)子比較簡(jiǎn)單;真核II啟動(dòng)子比較復(fù)雜,除了核心啟動(dòng)子之外,還具有多種元件,如TATA框,GC框,CAAT框,OCT等。除此之外,還有遠(yuǎn)端調(diào)控序列,如增強(qiáng)子(enhancer)、絕緣子(isolator)、沉默子(silencer)等。載體的you化,可使基因表達(dá)事半功倍。 (2)抗性you化如新霉素抗性、嘌呤霉素、潮霉素抗性等。 (3)復(fù)制元件you化常用質(zhì)粒的復(fù)制起點(diǎn)you化和穿梭質(zhì)粒載體復(fù)制起點(diǎn)you化。 (4)標(biāo)志基因you化基因攜帶標(biāo)記,可以GFP、RFP、Luciferase標(biāo)記等。 (5)多克隆位點(diǎn)you化克隆位點(diǎn)you化,剔除不便的酶切位點(diǎn),插入合適的酶切位點(diǎn)。 收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn) 1. 真核表達(dá)載體構(gòu)建按照客戶需要表達(dá)的基因長(zhǎng)度定價(jià)。詳情請(qǐng)電詢。 2. 真核表達(dá)載體you化按照客戶需要you化的種類定價(jià),詳情請(qǐng)電詢。 服務(wù)周期 據(jù)客戶要求而定,詳情請(qǐng)電詢。 客戶須知 1. 如基因模板,載體等原材料由客戶提供,且后續(xù)實(shí)驗(yàn)中未涉及PCR,則本公司不保證終產(chǎn)品中目的片段的序列正確性。本公司原則上只用酶切鑒定的方式證明目的片段已經(jīng)成功亞克隆至目的載體上,如客戶需測(cè)序鑒定,需加收相關(guān)測(cè)序費(fèi)用。 2. 如基因模板,載體,引物等原材料由客戶提供,且后續(xù)實(shí)驗(yàn)中涉及PCR,客戶應(yīng)保證所提供原材料即基因模板的正確性。如基因模板本身具有移碼突變或堿基突變,由此造成的實(shí)驗(yàn)時(shí)間延誤、重復(fù)實(shí)驗(yàn)費(fèi)用或其它經(jīng)濟(jì)損失均由客戶承擔(dān)。(從客戶提供的基因模板調(diào)取基因,如重復(fù)兩次,均在相同位置出現(xiàn)相同突變,則認(rèn)為是模板問題。) 3. 客戶應(yīng)對(duì)所提供的材料及信息負(fù)責(zé),如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失均由客戶承擔(dān)。 服務(wù)程序 1. 可在我公司網(wǎng)站內(nèi)直接填寫《真核表達(dá)載體構(gòu)建(you化)服務(wù)訂單》發(fā)至我公司郵箱。 2. 可下載訂單,填寫完成后,用傳真的形式發(fā)到我公司。 3. 可電話聯(lián)系詳談?dòng)嘘P(guān)具體要求和服務(wù)內(nèi)容。 4. 簽訂《真核表達(dá)載體構(gòu)建(you化)服務(wù)合同》,預(yù)付實(shí)驗(yàn)總費(fèi)用的50%作為實(shí)驗(yàn)預(yù)付款。 5. 寄送:委托單位的試驗(yàn)材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄,有低溫要求的、固定要求的,按低溫保存、固定防碎方法運(yùn)輸,以確保實(shí)驗(yàn)物品的安可靠。 6. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,本公司將以下結(jié)果及時(shí)發(fā)給客戶,同時(shí)根據(jù)客戶要求處理相關(guān)材料: ·構(gòu)建成功的包含目的基因的真核表達(dá)載體。如涉及PCR,在客戶保證提供的模板正確的前提下,本公司保證PCR擴(kuò)增的基因或功能元件片段無移碼突變,堿基序列正確率100%。 ·提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告、測(cè)序報(bào)告。
FAQ: 載體構(gòu)建的價(jià)格是否包括吊取基因的價(jià)格?如果不包括,吊取基因的價(jià)格是多少? 不包括,基因調(diào)取的價(jià)格另計(jì)。詳情請(qǐng)見基因調(diào)取服務(wù)。 真核載體的購買價(jià)格算在克隆構(gòu)建價(jià)格里嗎?ALL的真核載體價(jià)格一樣嗎?我可以從公司購買真核載體嗎?公司為我做完載體構(gòu)建后,能提供不帶基因的空載體給我嗎? 真核載體的價(jià)格不包含在克隆構(gòu)建價(jià)格里面,但常用載體我公司可以免費(fèi)提供。不常用載體我們可以為客戶代購。我公司真核載體構(gòu)建服務(wù)介紹后,可以為客戶提供不帶基因的空載體。 真核表達(dá)時(shí),貴公司如何設(shè)置對(duì)照? 一般設(shè)置不含目的基因的空載體作為對(duì)照。 貴公司提供哪幾類真核細(xì)胞的表達(dá)系統(tǒng)? 我公司可以提供酵母、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)以及昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)。
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