腎移植是終末期腎病的首選和最有效的治療方法。盡管如此，腎移植的長期存活率仍然不是最理想的，因為移植患者最終會發(fā)生急性或慢性排斥反應。雖然組織活檢仍然是診斷腎移植排斥反應的金標準，但其存在許多缺點，包括固有的檢測風險、并發(fā)癥和相對較高的成本。此外，組織病理學分析常常會受到醫(yī)生讀片和數(shù)據(jù)統(tǒng)計的誤差。作為非侵入性的替代方法————血清肌酐（SCr）和尿蛋白檢測是兩種檢測手段，但是它們對同種異體移植排斥反應缺乏敏感性和特異性。SCr的增加是腎損傷的晚期標志，并且往往不能反映組織病理學揭示的早期炎癥過程。所以，目前亟待推動準確的無創(chuàng)生物標志物，實現(xiàn)對疾病活動的敏感、頻繁和有效的監(jiān)測并減少早期和晚期臨床排斥反應。

細胞外囊泡（EVs），包括外泌體和微囊泡在內(nèi)，能夠被細胞自主積極地分泌到生物流體中。EV攜帶細胞中的分子成分，包括跨膜的和細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和核酸。越來越多的研究表明，EV可以反映親本細胞的特性，數(shù)量豐富并具有結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，這些囊泡可以可用作替代的生物標志物。EV已廣泛應用于研究癌癥檢測；它們往往反映總體腫瘤負荷和異質(zhì)性，并能消除誤差。此外，腫瘤來源EV的數(shù)量和分子表達譜與腫瘤負荷和治療效果高度相關(guān)。

在本研究中，研究人員認為，尿液中的EV可以用來監(jiān)測腎移植排斥反應。在腎同種異體移植的急性細胞排斥（ACR）期間，T細胞浸潤腎小管并且與尿液形成過程形成對接；這就增加了T細胞來源的EV進入尿液的機會（圖1、圖2）。因此捕獲T細胞特異性EV可以作為ACR的替代生物標志物。在本研究里，研究人員報道了一個基于EV的腎臟排斥反應診斷平臺。他們設計了一個名為iKEA（整體腎外泌體測定法）的診斷方式，可以在尿液中檢測T淋巴細胞來源的EV（uEVs）。研究人員采用磁性電化學策略進行電化學檢測：T細胞特異性電化學免疫磁珠富集和電化學檢測。結(jié)合磁珠富集和酶促信號放大，iKEA具有高靈敏度（？104 EVs）和快速（2h）的特點，可以將檢測系統(tǒng)實現(xiàn)為便攜式設備。將iKEA應用于細胞培養(yǎng)和臨床尿液樣本，研究人員發(fā)現(xiàn)CD3是檢測T細胞來源的uEV的有效標記物。在進一步的臨床試驗中，基于CD3的iKEA在檢測組（30名患者）和驗證組（14名患者）中的診斷準確率分別達到了91.1％和83.7％。iKEA作為一種非侵入性連續(xù)監(jiān)測腎移植排異反應的有效工具，為臨床醫(yī)生提供可操作的信息以改善患者預后并減少腎移植并發(fā)癥。(世聯(lián)博研(Bioexcellence)世聯(lián)博研Bioexcellence）