開(kāi)發(fā)CRISPR/Cas9基因編輯療法的生物醫(yī)藥公司Intellia Therapeutics宣布，一項(xiàng)臨床前研究結(jié)果于近日發(fā)表在《Cell Reports》期刊上。在這項(xiàng)臨床前試驗(yàn)中取得的出色結(jié)果，也有望助力CRISPR/Cas9技術(shù)進(jìn)入人體臨床試驗(yàn)。

轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性（ATTR）是由TTR基因中約136個(gè)不同遺傳突變之一引起的慢性進(jìn)行性和衰弱性疾病。由這些基因突變引起的異常蛋白質(zhì)沉積可影響外周和自主神經(jīng)系統(tǒng)，導(dǎo)致患者在20歲左右時(shí)發(fā)生各種癥狀。

Intellia的體內(nèi)定點(diǎn)項(xiàng)目使用脂質(zhì)納米粒子（LNPs）將CRISPR/Cas9組合遞送到肝臟。該公司在體內(nèi)靶向ATTR的研究項(xiàng)目與Regeneron Pharmaceuticals共同開(kāi)發(fā)。Intellia旨在實(shí)現(xiàn)對(duì)肝細(xì)胞內(nèi)的突變TTR基因特定DNA實(shí)施敲除編輯。這些基因可導(dǎo)致心臟，神經(jīng)和其他組織中破壞性運(yùn)甲狀腺素蛋白沉積。

這項(xiàng)臨床前編輯研究旨在探索使用LNP將CRISPR/Cas9部分遞送至小鼠肝臟，介導(dǎo)肝細(xì)胞內(nèi)標(biāo)靶DNA的編輯。研究中將LNP，Cas9 mRNA與靶向小鼠TTR基因的化學(xué)合成gRNA的共同配方，通過(guò)一次尾靜脈注射到小鼠體內(nèi)。其他研究評(píng)估了在引導(dǎo)模式下不同因素對(duì)編輯的影響，化學(xué)修飾程度和有劑量反應(yīng)關(guān)系的編輯效率。通過(guò)四個(gè)月的時(shí)間，研究評(píng)估了肝臟內(nèi)編輯的耐久性，并測(cè)量了Cas9 mRNA和sgRNA的藥代動(dòng)力學(xué)（PK）參數(shù)。

研究顯示，脂質(zhì)納米粒子遞送Cas9 mRNA和sgRNA導(dǎo)致小鼠肝臟中運(yùn)甲狀腺素蛋白水平降低97％，并且至少維持12個(gè)月。該論文還報(bào)道了使用Intellia的LNP遞送系統(tǒng)后，三天內(nèi)在小鼠體內(nèi)檢測(cè)不到CRISPR/Cas9部分。研究人員進(jìn)一步表明，Intellia的LNP技術(shù)對(duì)更高級(jí)嚙齒動(dòng)物，如大鼠也具有類似的穩(wěn)定和有效的遞送結(jié)果。

“這些數(shù)據(jù)表明，我們專有的脂質(zhì)納米粒子技術(shù)通過(guò)單劑量實(shí)現(xiàn)了對(duì)TTR基因顯著和持久的編輯，”Intellia平臺(tái)和輸送技術(shù)高級(jí)副總裁David Morrissey博士說(shuō)：“我們的脂質(zhì)納米粒子系統(tǒng)是一種短暫表達(dá)系統(tǒng)，可使CRISPR/Cas9能夠編輯目標(biāo)基因，然后從細(xì)胞中清除。 這樣可以最大限度的減少細(xì)胞中CRISPR/Cas9的停留時(shí)間，并且減少與CRISPR/Cas9相關(guān)的安全問(wèn)題。如果需要，LNP還允許我們重新給藥，以達(dá)到預(yù)期的治療效果。本文詳細(xì)介紹了迄今為止最有效的全身性CRISPR/Cas9遞送方法，這將進(jìn)一步支持我們今年提出的IND項(xiàng)目和未來(lái)的肝臟遺傳疾病治療。”

我們期待這項(xiàng)技術(shù)能夠順利進(jìn)入臨床，早日為我們帶來(lái)新型基因編輯療法。(生物谷世聯(lián)博研Bioexcellence）