HCG 是懷孕的重要標(biāo)志物,由早期囊胚分泌。因此,如能定量檢測(cè)胚胎培養(yǎng)基中懷孕相關(guān)的生物標(biāo)志物如 HCG 等,則能大大輔助無(wú)創(chuàng)胚胎選擇,提高移植成功率。但目前的技術(shù)性壁壘,是胚胎上清的懷孕標(biāo)志物含量過(guò)低,低至常規(guī)檢測(cè)手段的靈敏度下限。
為了確定胚胎培養(yǎng)基中HCG的檢測(cè)限,證明超靈敏 Simoa 平臺(tái)可以用來(lái)檢測(cè)胚胎培養(yǎng)基中的 HCG 水平,并研究 HCG 水平與胚胎生存能力之間的關(guān)系,美國(guó)波士頓 Beth Israel Deaconess 醫(yī)療中心和試管嬰兒中心的科研人員聯(lián)合 Quanterix 公司,將最新最靈敏的單分子級(jí) simoa 技術(shù)用于檢測(cè)植入前配體培養(yǎng)基中的 HCG 水平,發(fā)現(xiàn)移植成功的囊胚培養(yǎng)基中的 HCG 水平較高。
研究方法
這是一項(xiàng)胚胎培養(yǎng)基的回顧性隊(duì)列研究,檢測(cè)兩種胚胎培養(yǎng)基:(1)Continuous Single Culture(CSC),Irvine,含血清蛋白補(bǔ)充劑(serum protein supplement,SPS),Origio;(2)Embryoglue(EG), Vitrolife。從轉(zhuǎn)移或冷凍的囊胚中獲取培養(yǎng)基。所有樣品都經(jīng)過(guò)鑒定。使用 Quanterix 開(kāi)發(fā)的超靈敏 Simoa 平臺(tái)對(duì)培養(yǎng)基中的 HCG 水平(pg/ml)進(jìn)行檢測(cè),并與編碼數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行匹配,以確定臨床妊娠(fetal heart beat: FHB)是否源于移植胚胎。
研究結(jié)果
進(jìn)行了兩組分析
第一組:CSC+10%SPS 培養(yǎng)基,胚胎在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)5天,結(jié)果顯示植入和非植入胚胎的 HCG 無(wú)差別,因?yàn)?SPS 中的 HCG 水平較高。
第二組:EG+重組白蛋白培養(yǎng)基(無(wú)血清),移植前胚胎在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)2-5小時(shí),EG 培養(yǎng)基空白對(duì)照顯示不含 HCG,2個(gè)陽(yáng)性 FHB 和2個(gè)陰性樣本之間的 HCG 水平有顯著差異。為模擬人體胚胎隊(duì)列,對(duì)10個(gè) EG 培養(yǎng)基和樣品進(jìn)行盲測(cè)(5個(gè)陽(yáng)性 FHB 和5個(gè)陰性),并檢測(cè)2個(gè)空白對(duì)照?;? Simoa 檢測(cè)的 HCG 濃度進(jìn)行排序,前4個(gè)胚胎中檢測(cè)出3個(gè)陽(yáng)性。
檢測(cè)結(jié)果在很大程度上與胚胎在培養(yǎng)基中培養(yǎng)的時(shí)間相關(guān),另外需要用干凈的不會(huì)掩蓋原始信號(hào)的培養(yǎng)基補(bǔ)充劑。研究結(jié)果表明,超靈敏 Simoa 平臺(tái),可以作為胚胎選擇的重要輔助手段。(生物谷Bioon.com)
小編推薦會(huì)議
2019臨床質(zhì)譜與高端醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)發(fā)展論壇
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