CAR-T細(xì)胞治療：市場(chǎng)迎新 政策加持 研發(fā)突破

2017年8月，全球迎來(lái)首款上市的CAR-T療法，美國(guó)FDA批準(zhǔn)諾華的Kymriah用于25歲以下復(fù)發(fā)難治性B淋巴細(xì)胞急性白血病(B-ALL)患者。這是一個(gè)歷史性的里程碑事件。緊接著的10月，吉利德/Kite Pharma的Yescarta獲FDA批準(zhǔn)，用于治療復(fù)發(fā)難治性大B細(xì)胞淋巴瘤的成年患者。

距離上一次的CAR-T療法獲批已經(jīng)過(guò)去兩個(gè)年頭，其在免疫治療領(lǐng)域的熱度從未退去。2019年即將進(jìn)入尾聲，小編帶您來(lái)回顧一下這一年CAR-T療法領(lǐng)域值得關(guān)注的一些事件。

CAR-T進(jìn)軍亞洲市場(chǎng)，中國(guó)蓄勢(shì)待發(fā)

自2017年正式于美國(guó)上市后，兩款CAR-T便開始了其擴(kuò)張之路，目前都已成功在歐盟和加拿大獲批上市。2019年3月，日本厚生勞動(dòng)省(MHLW)正式批準(zhǔn)了Kymriah用于治療CD19陽(yáng)性復(fù)發(fā)或難治性（r / r）B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）和CD19陽(yáng)性r / r彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）。日本成為第一個(gè)批準(zhǔn)CAR-T療法的亞洲國(guó)家。

中國(guó)，在全球CAR-T研發(fā)中一直處于領(lǐng)先地位，目前雖還未有CAR-T療法獲批上市，但中國(guó)市場(chǎng)一直是其必爭(zhēng)之地。2017年4月，復(fù)星醫(yī)藥就和美國(guó)Kite Pharma攜手共建合營(yíng)公司復(fù)星凱特，因此Yescarta獲批后便早早的開啟了在中國(guó)的產(chǎn)業(yè)化之路，2018年在中國(guó)以代號(hào)FKC876（益基利侖賽(擬定)）獲批臨床試驗(yàn)用于治療復(fù)發(fā)難治性大B細(xì)胞淋巴瘤，有可能成為第一個(gè)在中國(guó)實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化落地獲批的細(xì)胞治療產(chǎn)品。

2019年10月30日，諾華（中國(guó)）在今年8月遞交的一項(xiàng)關(guān)于CAR-T療法Kymriah（CTL019 ）的臨床試驗(yàn)申請(qǐng)獲得默示許可，適應(yīng)癥為復(fù)發(fā)性或難治性侵襲性B-細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤。

截至目前，在中國(guó)已有20余家企業(yè)的30多款CAR-T候選產(chǎn)品獲IND受理，今年科濟(jì)生物、重慶精準(zhǔn)生物、上海斯丹賽生物、華道（上海）生物、合源生物、上海細(xì)胞治療工程技術(shù)研究中心、南京馴鹿醫(yī)療技術(shù)有限公司、諾華(中國(guó))、博生吉安科共獲得12張CAR-T臨床試驗(yàn)許可批件，其中上海科濟(jì)生物斬獲3張。

CAR-T多國(guó)入醫(yī)保，中國(guó)未來(lái)可期

兩款CAR-T上市后的確給部分患者帶來(lái)了治愈的希望，但其昂貴的價(jià)格往往讓多數(shù)患者望而卻步（Kymriah定價(jià)為47.5萬(wàn)美元，Yescarta定價(jià)為37.3萬(wàn)美元），因此各國(guó)的醫(yī)保政策相繼出爐。

美國(guó)

2019年2月15日，美國(guó)醫(yī)療保險(xiǎn)和醫(yī)療補(bǔ)助服務(wù)中心(CMS)正式發(fā)布擬議決定備忘錄：批準(zhǔn)CAR-T細(xì)胞治療正式納入醫(yī)保。8月，CMS宣布不僅支付CAR-T細(xì)胞療法的費(fèi)用，還支付所有相關(guān)服務(wù)費(fèi)用，包括藥物管理、細(xì)胞的收集和處理、細(xì)胞的回輸、以及門診或者住院的治療費(fèi)用，實(shí)現(xiàn)了CAR-T治療費(fèi)用全覆蓋。根據(jù)CMS規(guī)定，當(dāng)這些療法在FDA風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和緩解策略(REMS)登記的醫(yī)療機(jī)構(gòu)中提供，并且適應(yīng)癥也是FDA批準(zhǔn)的情況下，醫(yī)療保險(xiǎn)將會(huì)覆蓋。此外，聯(lián)邦醫(yī)療保險(xiǎn)將涵蓋FDA批準(zhǔn)的用于說(shuō)明書以外的適應(yīng)癥的治療，但這些治療方法是由CMS批準(zhǔn)的指南推薦的。

以色列

以色列是全球唯一與美國(guó)醫(yī)師資格證互認(rèn)的國(guó)家，世界范圍內(nèi)經(jīng)美國(guó)FDA批準(zhǔn)的藥物均在以色列同步上市。今年年初以色列衛(wèi)生部將CAR-T細(xì)胞治療加入到國(guó)家健康保險(xiǎn)中批準(zhǔn)用于癌癥治療的公共健康保險(xiǎn)中。根據(jù)以色列醫(yī)療中心的數(shù)據(jù)，CAR-T療法僅限于50歲以下的患者，而且該方案要求至少住院兩周。尤其是年輕患者在這種治療方式下的康復(fù)方面取得了巨大的成功，幼兒高達(dá)90%，青少年約80%。

歐盟

早在EMA批準(zhǔn)兩款CAR-T上市后不到十天(2018年9月5日)，英國(guó)國(guó)民健康服務(wù)體系(NHS)已經(jīng)與諾華就Kymriah達(dá)成保險(xiǎn)覆蓋協(xié)議，這也標(biāo)志著歐洲國(guó)家首次同意為CAR-T療法提供資金，也是 NHS England（NHS 下屬獨(dú)立機(jī)構(gòu)） 70 年歷史上最快的資金批準(zhǔn)之一。2個(gè)月后(2018年11月16日)，英國(guó)藥品成本效益監(jiān)管機(jī)構(gòu)國(guó)家衛(wèi)生與臨床優(yōu)化研究所(NICE)決定推薦Kymriah用于患有復(fù)發(fā)或難治性B-ALL的年輕患者（ 25 歲以下），這部分患者通過(guò)癌癥藥物基金會(huì)(CDF)向諾華申請(qǐng)獲得Kymriah進(jìn)行治療。2019年2月1日，NICE發(fā)布公告稱，復(fù)發(fā)或難治性DLBCL的成年患者也可以通過(guò)CDF獲得Kymriah。2018年12月7日，NICE發(fā)布最終草案指南，向CDF推薦了Yescarta。2019年2月中旬，蘇格蘭藥品聯(lián)合會(huì)(SMC)批準(zhǔn)Kymriah納入蘇格蘭NHS，以用于25歲以下患有復(fù)發(fā)或難治性B-ALL患者，稱保密折扣使其“可以接受使用蘇格蘭NHS的有限資源”。

日本

據(jù)NHK2019年5月15日?qǐng)?bào)道，日本中央社會(huì)保險(xiǎn)醫(yī)療協(xié)議會(huì)，批準(zhǔn)將CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品Kymriah，于5月22日起納入醫(yī)保，定價(jià)約3350萬(wàn)日元(約合人民幣210萬(wàn)元)，據(jù)日本厚生勞動(dòng)省稱，此為當(dāng)前日本納入醫(yī)保中的價(jià)格最高的藥品。納入醫(yī)保后，按照日本公共醫(yī)療保險(xiǎn)的“高額療養(yǎng)費(fèi)制度”來(lái)計(jì)算，使用Kymriah的大部分費(fèi)用將由日本的公共保險(xiǎn)承擔(dān)，患者最低只需負(fù)擔(dān)41萬(wàn)日元(人民幣2.57萬(wàn)元)的藥費(fèi)。且只要是持有合法簽證，加入日本醫(yī)保并按期繳納費(fèi)用的外國(guó)人也適用。

加拿大

2019年1月，加拿大衛(wèi)生藥品和技術(shù)機(jī)構(gòu)(CADTH)召集的一個(gè)專家小組報(bào)告稱，如果制造商降價(jià)，Kymriah應(yīng)該被公開覆蓋，并可能會(huì)使加拿大衛(wèi)生保健系統(tǒng)在三年內(nèi)花費(fèi)超過(guò)4億美元。整個(gè)CAR-T治療的成本一方面集中在藥物的生產(chǎn)成本，另一方面則來(lái)自于維持治療成本。制造成本和前期研發(fā)成本導(dǎo)致了CAR-T療法成本仍然十分高昂，給CAR-T進(jìn)入醫(yī)保造成了一定的壁壘。很多制藥公司和研發(fā)機(jī)構(gòu)已經(jīng)意識(shí)到，通過(guò)完善自動(dòng)化CAR-T制備來(lái)降低成本是一種有效的途徑，這也成為當(dāng)前CAR-T開發(fā)商追求的目標(biāo)。目前中國(guó)有多家醫(yī)藥企業(yè)爭(zhēng)相進(jìn)入CAR-T領(lǐng)域，可以預(yù)見該領(lǐng)域在未來(lái)若干年是一片藍(lán)海。相信隨著國(guó)內(nèi)的CAR-T領(lǐng)域高速發(fā)展，CAR-T形成產(chǎn)業(yè)化價(jià)格下降之后，中國(guó)將其納入醫(yī)保，未來(lái)可期。

CAR-T上市第二戰(zhàn)隊(duì)，年末壓軸入場(chǎng)

2019年12月11日，吉利德(Gilead)旗下Kite已向FDA提交了該公司第二款自體CD19 CAR-T療法KTE-X19的生物制劑許可申請(qǐng)(BLA)。在關(guān)鍵性II期臨床試驗(yàn)ZUMA-2中，KTE-X19治療復(fù)發(fā)/難治性套細(xì)胞淋巴瘤(MCL)患者獲得了93%的總緩解率(ORR)和67%的完全緩解(CR)；安全性方面，出現(xiàn)3級(jí)以上CRS和神經(jīng)毒性的患者比例分別為15%和31%。這使得KTE-X19有望成為首款治療MCL的CAR-T療法。緊隨其后，12月18日，百時(shí)美施貴寶(BMS)在距離以740億美元成功收購(gòu)新基(Celgene)不久后，宣布已向美國(guó)FDA提交了lisocabtagene maraleucel (liso-cel， 以前稱為JCAR017)的BLA。liso-cel是一款自體CD19 CAR-T療法，CD4+和CD8+ CAR-T細(xì)胞按照1：1比例回輸，用于治療既往至少2種方案系統(tǒng)治療失敗的復(fù)發(fā)/難治性大B細(xì)胞淋巴瘤(LBCL)成人患者。另外南京傳奇公司最早和楊森（Janssen）公司合作開發(fā)的攜帶兩個(gè)靶向BCMA的抗體蛋白域的CAR-T療法JNJ-4528（又名LCAR-B38M），是首個(gè)獲得FDA批準(zhǔn)臨床試驗(yàn)的中國(guó)自主研發(fā)的細(xì)胞療法；此外，Janssen還與BMS（新基）/bluebird bio（藍(lán)鳥生物）的bb2121（靶向BCMA）有望在明年遞交BLA；今年7月，科濟(jì)生物BCMA-CAR-T也宣布在中國(guó)美國(guó)加拿大都已經(jīng)獲批臨床。血液腫瘤穩(wěn)步發(fā)展，實(shí)體瘤尋求突破因血液腫瘤的特殊性質(zhì)及靶點(diǎn)特異性，CAR-T細(xì)胞治療法目前在血液系統(tǒng)惡性腫瘤治療中取得了巨大的突破并展現(xiàn)出的強(qiáng)大實(shí)力。全球范圍內(nèi)已經(jīng)上市的兩種靶向CD19的CAR-T療法，適應(yīng)癥都為血液腫瘤，已成功實(shí)現(xiàn)商業(yè)化。四款有望明年上市的CAR-T療法，Kite Pharma的KTE-X19（靶向CD19）治療R/R套細(xì)胞淋巴瘤（MCL）），楊森（Janssen）/南京傳奇公司合作開發(fā)的的JNJ-4528（又名LCAR-B38M）治療治療復(fù)發(fā)難治性多發(fā)性骨髓瘤（R/R MM），百時(shí)美施貴寶（BMS）/bluebird bio的bb2121（靶向BCMA）治療R/R MM；BMS的JCAR017（靶向CD19）治療復(fù)發(fā)/難治性彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL），針對(duì)的靶點(diǎn)集中在CD19和BCMA，適應(yīng)癥依然還是針對(duì)的血液腫瘤?！?年之內(nèi)，所有血液腫瘤都可以通過(guò)CAR-T療法實(shí)現(xiàn)治愈。”2019年騰訊科學(xué)WE大會(huì)開幕前夕，權(quán)威癌癥免疫學(xué)家、美國(guó)藝術(shù)與科學(xué)院院士Carl June接受媒體采訪時(shí)如是預(yù)測(cè)。目前CAR-T療法在血液腫瘤中的研發(fā)已相對(duì)趨于穩(wěn)定，更多的集中于解決其生產(chǎn)制造和副作用（CRS和神經(jīng)毒性）的問(wèn)題。優(yōu)化CAR結(jié)構(gòu)：

全人源化CAR-T成果喜人 CAR是以抗體的scFv（單鏈可變區(qū)）識(shí)別腫瘤抗原的，scFv序列是CAR-T研發(fā)中的核心技術(shù)，篩選一個(gè)合適的scFv序列，時(shí)間成本和費(fèi)用成本都不低，且人源化的比鼠源更高，但以“人源化”CAR-T代替“鼠源化”CAR-T可降低排斥作用，降低復(fù)發(fā)率，提高CAR-T的安全性和有效性。scFv由重鏈、輕鏈以及之間的linker連接而成，將不同的重鏈和輕鏈隨機(jī)組合，可以建成人源化的scFv組合抗體文庫(kù)，再通過(guò)表達(dá)量、穩(wěn)定性、與抗原的親和力等指標(biāo)進(jìn)行篩選。目前已經(jīng)有CD19，CD22，CD30，BCMA等全人源CAR-T用于臨床試驗(yàn)。其中由馴鹿醫(yī)療和信達(dá)生物制藥聯(lián)合開發(fā)的CT103A（靶向BCMA），它以慢病毒為基因載體轉(zhuǎn)染自體T細(xì)胞，CAR包含全人源scFv、CD8a 鉸鏈和跨膜、4-1BB共刺激和CD3z激活結(jié)構(gòu)域?；趪?yán)格的篩選，通過(guò)全面的體內(nèi)外功能評(píng)價(jià)，CT103A CAR-T產(chǎn)品在復(fù)發(fā)/難治性多發(fā)性骨髓瘤(RRMM)患者中具有強(qiáng)有力和快速的療效，并有突出的持久性。2019年12月7-10日的第61屆ASH年會(huì)上，華中科技大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院開展的一項(xiàng)研究者發(fā)起的臨床研究(IIT)中，CT103A獲得了令人印象深刻的安全性、有效性和持久性，在已完成的18例經(jīng)典I期爬坡試驗(yàn)中，可評(píng)估的17例患者，客觀緩解率（ORR）達(dá)100%，完全緩解（sCR/CR）為70.6%，很好的部分緩解（VGPR）或更好的療效為88.2%。17/18例患者發(fā)生CRS（1-2級(jí)72.2%（13例），3級(jí)16.7%（3例），4級(jí)5.6%（1例））。最低劑量組（1*10^6 cells/kg）中，2級(jí)或以下的CRS發(fā)生率為88%，但總體可控且無(wú)神經(jīng)毒性。值得注意的是，該研究還包括4名先前已接受過(guò)鼠源抗BCMA CAR-T治療后復(fù)發(fā)的受試者，他們整體表現(xiàn)表明，CT103A還可以為鼠源性CAR-T治療后復(fù)發(fā)的患者提供一種再治療的選擇。2019年9月10日，CT103A獲得了國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）Ib/II期嵌合方案的IND默示許可(受理號(hào)：CXSL1900060)，預(yù)計(jì)將于2020年初開始II期臨床試驗(yàn)。

CD19-BBz（86）

為了找到比FDA批準(zhǔn)的兩種CAR-T療法中使用的更安全的CAR(嵌合抗原受體)分子。美國(guó)南加州大學(xué)(USC)、北京馬力喏公司與北京大學(xué)的研究人員合作，設(shè)計(jì)了一種新型的抗CD19 CAR 分子（CD19-BBz(86)）。他們使用了三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)程序(Phrye2)的指導(dǎo)，通過(guò)基因改造編碼CD19-BBz CAR構(gòu)建體原型(CD19-BBz(71))中CD8α分子胞外和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的序列，創(chuàng)建了一組代表性CD19-BBz變異體，并鑒定了產(chǎn)生細(xì)胞因子能力降低的CAR變異體。CD19-BBz(86) CAR T細(xì)胞產(chǎn)生較低水平的細(xì)胞因子，表達(dá)較高水平的抗凋亡分子并且比第二代抗CD19 CAR原型CD19-BBz CAR-T細(xì)胞增殖更慢，使患者的身體有更多時(shí)間清除血液中的細(xì)胞因子；同時(shí)保留了有效的細(xì)胞溶解活性。因此，CD19-BBz(86) CAR T細(xì)胞具有良好的治療效果，且不會(huì)引起嚴(yán)重的CRS和神經(jīng)毒性。2019年4月22日，發(fā)表在Nature Medicine的一項(xiàng)最新研究中，CD19-BBz(86)CAR-T細(xì)胞在25名難治性淋巴瘤患者中，均沒(méi)有產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用。盡管該研究旨在考慮安全性而非有效性，但接受常用劑量的11名參與者中有6名完全緩解。

目前研究人員正在計(jì)劃在更大群體的患者中進(jìn)行2期研究。如果進(jìn)一步的研究證實(shí)了這些早期的測(cè)試結(jié)果，CD19-BBz(86) CAR-T有可能克服這兩個(gè)通常限制CAR-T細(xì)胞治療有效性的副作用。值得一提的是，該CAR-T產(chǎn)品已在2018年10月8日獲得中國(guó)的臨床試驗(yàn)許可批件(CXSL1700122)。

“裝甲”CAR-T美國(guó)進(jìn)臨床

斯丹賽的新一代“裝甲”CAR-T產(chǎn)品ICTCAR014靶向CD19，該CAR-T細(xì)胞表面表達(dá)Dominant Negative PD-1來(lái)阻斷腫瘤細(xì)胞的免疫抑制通路，在臨床上，與常規(guī)CAR-T細(xì)胞相比，這些“裝甲” CAR-T細(xì)胞在多輪腫瘤攻擊后表現(xiàn)出增強(qiáng)的殺傷能力，并且表現(xiàn)出更多的“記憶樣”表型。

2019年12月4日，ICTCAR014獲得美國(guó)FDA臨床試驗(yàn)許可，針對(duì)復(fù)發(fā)性或難治性非霍奇金淋巴瘤（r/r NHL）。

快速生產(chǎn)CAR-T

2019年11月，一個(gè)賓大的研究團(tuán)隊(duì)在美國(guó)血液學(xué)學(xué)會(huì)（ASH）會(huì)議公布了一份研究摘要，宣布其可在短短24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生功能性CD19特異性CAR-T細(xì)胞（CART19）。該研究研究描述了使用慢病毒載體可在一天內(nèi)產(chǎn)生功能性CD19特異性CAR-T細(xì)胞（CART19），而無(wú)需事先激活T細(xì)胞。摘要中顯示，使用非優(yōu)化過(guò)程，可以使用表達(dá)紅外紅色熒光蛋白（iRFP）的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)平均6.5％（范圍為2％-10％）的新鮮分離的靜態(tài)T細(xì)胞，與活化的T細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)相比，表達(dá)動(dòng)力學(xué)更慢（靜態(tài)和活化T細(xì)胞分別在96小時(shí)和48小時(shí)達(dá)到峰值）。盡管與活化的T細(xì)胞相比效率低得多，但在所有T細(xì)胞亞群中檢測(cè)，其中央記憶T細(xì)胞顯示出最大的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率；與未處理的T細(xì)胞相比，平均轉(zhuǎn)導(dǎo)率高4倍。賓大團(tuán)隊(duì)證明了即使沒(méi)有逆轉(zhuǎn)錄或整合酶功能，CAR表達(dá)也可以在靜態(tài)的T細(xì)胞中發(fā)生，即所謂的“偽轉(zhuǎn)導(dǎo)”。重要的是，賓大團(tuán)隊(duì)證明了該表達(dá)產(chǎn)生的CAR-T細(xì)胞具有溶細(xì)胞活性和效應(yīng)細(xì)胞因子，對(duì)抗原的反應(yīng)類似于激活和轉(zhuǎn)導(dǎo)的CAR-T細(xì)胞。這是繼亙喜生物開發(fā)其新型FasT CAR-T 生產(chǎn)平臺(tái)，將 CAR-T 制造時(shí)間從兩周縮短至一天后的又一技術(shù)革新。體內(nèi)和體外研究顯示，CD19靶向 FasT CAR-T (“CD19-F-CAR-T") 對(duì)B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病 (B-ALL) 和非霍奇金淋巴瘤 (NHL) 均具有更高的療效。

實(shí)體瘤突破

雖然全球約90％的癌癥病例是實(shí)體腫瘤，但一直以來(lái)，與血液腫瘤相比，實(shí)體瘤的抗原異質(zhì)性，免疫抑制性微環(huán)境，以及厚實(shí)的細(xì)胞外基質(zhì)等讓細(xì)胞療法難以有效發(fā)揮，因此成為細(xì)胞療法治療癌癥的主戰(zhàn)場(chǎng)。

根據(jù)今年5月在Nature Reviews Drug Discovery發(fā)表的一篇綜述的數(shù)據(jù)（截止2019年3月的調(diào)查概況），自1993年以來(lái)已開始的細(xì)胞治療試驗(yàn)中只有約一半(1，203項(xiàng)試驗(yàn)中的596項(xiàng))針對(duì)實(shí)體腫瘤，并且大多數(shù)針對(duì)實(shí)體瘤的細(xì)胞治療試驗(yàn)集中在少數(shù)腫瘤類型， 如黑色素瘤、大腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥、和肝癌，許多實(shí)體瘤類型沒(méi)有進(jìn)行任何專門的細(xì)胞治療試驗(yàn)。但在活躍的臨床前細(xì)胞療法中，242個(gè)是專門針對(duì)實(shí)體腫瘤設(shè)計(jì)的，而172種是針對(duì)血液腫瘤設(shè)計(jì)的，這表明細(xì)胞治療領(lǐng)域?qū)?shí)體腫瘤的興趣日益濃厚。

CAR-T細(xì)胞療法作為細(xì)胞療法的主力軍，克實(shí)體瘤的腳步從未停止過(guò)。截至2019年5月，在ClinicalTrials.gov注冊(cè)的大約總共510個(gè)CAR-T臨床試驗(yàn)中，160個(gè)已完成或正在進(jìn)行的CAR-T臨床試驗(yàn)針對(duì)實(shí)體瘤，其中64％在I期，30％在I/II期，3%在II期，2%是長(zhǎng)期隨訪，1%是回顧性研究。國(guó)內(nèi)，科濟(jì)生物醫(yī)藥的靶向GPC3的CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品于今年年初（1月24日）獲得CDE批準(zhǔn)臨床試驗(yàn)，這是我國(guó)首個(gè)用于治療實(shí)體瘤的CAR-T細(xì)胞藥物。

目前，開發(fā)克服免疫抑制性腫瘤環(huán)境、腫瘤可及性和浸潤(rùn)性、以及優(yōu)化CAR-T功能的方法和技術(shù)，是CAR-T領(lǐng)域提高實(shí)體腫瘤治療水平的研究焦點(diǎn)。下表描述了一些CAR-T治療實(shí)體瘤的策略，其重點(diǎn)是同時(shí)解決多個(gè)逃避機(jī)制并廣泛適用于不同的實(shí)體瘤適應(yīng)癥。

分泌型CAR-T

2019年6月27日，OncoSec公司與美國(guó)哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院達(dá)納-法伯癌癥研究所(Dana-Farber cancer Institute)以及由Wayne Marasco博士(美國(guó)著名的癌癥免疫學(xué)研究人員)領(lǐng)導(dǎo)的頂尖CAR-T細(xì)胞研究實(shí)驗(yàn)室展開合作，開發(fā)針對(duì)三陰性乳腺癌和其他實(shí)體腫瘤的CAR-T療法，該方法旨在通過(guò)靶向兩種抗原的雙特異性CAR以減輕脫靶毒性，并且利用檢查點(diǎn)阻斷抗體的分泌以消除TME中的免疫抑制。

這是基于Wayne Marasco博士實(shí)驗(yàn)室開發(fā)出的一種專有策略，通過(guò)使用雙特異性CAR系統(tǒng)來(lái)限制脫靶(on-target/off-tumor)毒性，該系統(tǒng)中的兩個(gè)單鏈可變片段(scFv)被連接起來(lái)，以驅(qū)動(dòng)細(xì)胞內(nèi)足以激活/殺死T細(xì)胞的信號(hào)。只有當(dāng)兩個(gè)靶標(biāo)同時(shí)作用于腫瘤時(shí)，才會(huì)觸發(fā)這種激活/殺傷。這種設(shè)計(jì)有望大大降低CAR-T細(xì)胞介導(dǎo)不可控的免疫副作用，從而提高安全性。

類似地，Eureka Therapeutics (優(yōu)瑞科公司)和MSKCC(紀(jì)念斯隆凱特琳癌癥中心)團(tuán)隊(duì)也在設(shè)計(jì)一種分泌免疫調(diào)節(jié)抗體的CAR-T細(xì)胞。這種CAR-T細(xì)胞分泌迷你版本的PD-1檢查點(diǎn)阻斷抗體(ScFvs are smaller)，在體內(nèi)的持續(xù)時(shí)間均比傳統(tǒng)CAR更長(zhǎng)，同時(shí)，還產(chǎn)生了更好的治療結(jié)果。

2019年7月22日，馬薩諸塞州綜合醫(yī)院和哈佛醫(yī)學(xué)院的研究人員在Nature Biotechnology上發(fā)表了一項(xiàng)研究，將先前的CAR-T細(xì)胞改造為“微型藥房”。具體來(lái)說(shuō)，他們構(gòu)建出一種分泌雙特異性T細(xì)胞銜接蛋白（bi-specific T-cell engager， BiTE）的CAR-T細(xì)胞，針對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤。首先，識(shí)別單個(gè)特定靶點(diǎn)的CAR-T細(xì)胞無(wú)法有效擊退腫瘤；另一方面，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤位于腦中，抗體得通過(guò)血腦屏障才能起效，這對(duì)于分子量較大的BiTE有難度。為此，研究團(tuán)隊(duì)把表達(dá)BiTE的基因?qū)朐瓉?lái)的CAR-T細(xì)胞，當(dāng)T細(xì)胞進(jìn)入大腦后，再持續(xù)產(chǎn)生BiTE“咬住”腫瘤細(xì)胞，募集并激活T細(xì)胞達(dá)到殺傷腫瘤的作用。

對(duì)抗T細(xì)胞衰竭

2019年2月27日發(fā)表在Nature雜志上的一項(xiàng)研究表明，拉霍亞免疫學(xué)研究所(LJI)的科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)了一種對(duì)抗T細(xì)胞衰竭的方法，使CAR-T細(xì)胞療法更加有效。他們的新研究表明，一個(gè)名為Nr4a的轉(zhuǎn)錄因子蛋白質(zhì)家族在調(diào)節(jié)與T細(xì)胞衰竭相關(guān)基因方面發(fā)揮著重要作用。通過(guò)小鼠模型，科學(xué)家們證明，用缺乏這些Nr4a轉(zhuǎn)錄因子的CAR-T細(xì)胞治療小鼠，可以使腫瘤變小，存活率更高。

2019年12月4日，斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院研究人員發(fā)表在Nature上的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，一種編程CAR-T細(xì)胞的新方法可以延長(zhǎng)它們的活性，并增強(qiáng)它們抗癌效力。他們發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞衰竭與IL-2產(chǎn)生過(guò)程中的一個(gè)嚴(yán)重缺陷有關(guān)，同時(shí)AP-1轉(zhuǎn)錄因子基序染色質(zhì)的可及性增加以及bZIP和IRF轉(zhuǎn)錄因子過(guò)表達(dá)也與衰竭T細(xì)胞功能障礙有關(guān)。結(jié)果顯示，經(jīng)典AP-1因子c-Jun（一種增加與T細(xì)胞活化相關(guān)蛋白表達(dá)的基因）的功能缺陷是T細(xì)胞耗揭的關(guān)鍵原因。而通過(guò)過(guò)表達(dá)c-Jun來(lái)恢復(fù)CAR-T細(xì)胞的平衡后，即使在通常會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞衰竭的條件下，這些細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)室中仍然保持活躍和增殖狀態(tài)，并能延長(zhǎng)患者（小鼠）生存壽命。研究人員證明了在五種不同的小鼠體內(nèi)腫瘤模型中，使用過(guò)表達(dá)c-Jun的CAR-T細(xì)胞具有增強(qiáng)擴(kuò)增潛能、增強(qiáng)功能效力、減少終末分化和提高抗腫瘤效力的作用。另外，過(guò)表達(dá)c-Jun還能增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞靶向?qū)嶓w瘤的能力，為CAR-T的臨床治療提供新思路。

神奇金屬薄膜，送CAR-T細(xì)胞直達(dá)實(shí)體瘤

已知對(duì)于實(shí)體腫瘤，經(jīng)靜脈注射的CAR-T細(xì)胞不僅難以進(jìn)入腫瘤并以戰(zhàn)勝癌癥所需的數(shù)量與腫瘤結(jié)合，也難以在腫瘤病灶形成的不利微環(huán)境中生存。2019年12月9日，F(xiàn)red Hutchinson（弗雷德哈欽森）癌癥研究中心的Matthias Stephan團(tuán)隊(duì)在 Nature Biomedical Engineering 雜志上發(fā)表了一項(xiàng)研究，他們成功研制了一種可以將CAR-T細(xì)胞直接“空降”至腫瘤組織周圍的金屬網(wǎng)膜。

他們選擇用于修復(fù)骨折、矯正牙齒和防止動(dòng)脈阻塞的金屬——鎳鈦，制成了厚度為10微米，具有類似迷宮自上而下視圖的直線圖案結(jié)構(gòu)的金屬薄膜。研究人員在鎳鈦薄膜上涂上了纖維蛋白和刺激分子（CD3、CD28和CD137）。該纖維蛋白是一種存在于血液中的纖維蛋白，為T細(xì)胞提供爬行需要的“手柄”，刺激分子則模擬T細(xì)胞接收的信號(hào)，使其快速擴(kuò)增。因此這不僅僅是一個(gè)被動(dòng)的遞送裝置，還是一個(gè)釋放平臺(tái)，可以觸發(fā)CAR-T細(xì)胞的擴(kuò)增，從而克服腫瘤對(duì)免疫細(xì)胞的防御。

重塑腫瘤微環(huán)境

2019年11月13日Cellectis公司的研究人員發(fā)表在Nature Communications上的研究顯示，通過(guò)使用該公司專有的TALEN？ 技術(shù)，重新利用T細(xì)胞活化途徑的三個(gè)主要參與者TCRα、CD25和PD1基因，從而使得CAR-T細(xì)胞能夠通過(guò)以腫瘤和時(shí)間依賴性方式微量分泌促炎細(xì)胞因子白介素12(IL-12)重塑腫瘤微環(huán)境。

這種新的“smart” CAR-T治療方法能夠通過(guò)微分泌治療蛋白對(duì)腫瘤進(jìn)行感知和反應(yīng)，從而提高其對(duì)抗癌細(xì)胞的能力。這種嚴(yán)格控制工程化T細(xì)胞產(chǎn)生、分泌或遞呈外源目的蛋白的新工程策略將對(duì)開發(fā)下一代基于T細(xì)胞的療法有重要意義。

展望近年來(lái)，科學(xué)家們已經(jīng)做出了相當(dāng)大的努力來(lái)開發(fā)新的方法來(lái)克服CAR-T療法的障礙并擴(kuò)展現(xiàn)有的適應(yīng)癥。血液腫瘤方面目前的開發(fā)在于進(jìn)一步的優(yōu)化，生產(chǎn)制造與成本問(wèn)題的解決是這一療法能得以更廣泛應(yīng)用的關(guān)鍵之一。而對(duì)于實(shí)體瘤，我們相信越來(lái)越多的臨床前/臨床數(shù)據(jù)終將拼湊成一幅完整的拼圖，使CAR-T細(xì)胞能在這一領(lǐng)域展示真實(shí)的能力。(生物谷世聯(lián)博研Bioexcellence？

小編推薦會(huì)議  2020（第十一屆）細(xì)胞治療國(guó)際研討會(huì)
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