病毒性心肌炎（viral myocarditis，VMC）是由多種病毒感染引起心肌炎癥病變，該疾病臨床確診比較困難，到目前為止，心內(nèi)膜活檢仍然是VMC確診的金標(biāo)準(zhǔn)，由于心肌活檢難度大，并且存在創(chuàng)傷風(fēng)險，導(dǎo)致其在臨床上不能廣泛開展。有研究報道，血液外泌體可能在柯薩奇B病毒引起的VMC發(fā)病的病理生理機(jī)制中扮演重要角色。通過比較心血管疾病患者血漿外泌體差異蛋白質(zhì)組，有可能篩選出隱藏的生物學(xué)信息，這將為尋找敏感特異的生物標(biāo)志物及新的藥物靶點(diǎn)提供新的思路。

河南省人民醫(yī)院心內(nèi)科趙宗磊等分別收集河南省人民醫(yī)院（2016年1月至2017年12月）Control組健康人及VMC組患者血漿標(biāo)本各50份，按照隨機(jī)數(shù)字表法選取Control組（n=5）與VMC組（n=5）空腹血漿標(biāo)本各1 ml，分別利用超速離心法提取血漿外泌體后，采用差異凝膠雙向電泳（DIGE）技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)分離，經(jīng)差異分析軟件處理后，采集VMC組和Control組之間差異>2倍的蛋白質(zhì)點(diǎn)，通過應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時間/飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF/TOF MS）對差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行鑒定。各組隨機(jī)采取40份血漿外泌體標(biāo)本，采用VMC特異性差異蛋白進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗（ELISA）驗證。分析健康對照組（Control組）與病毒性心肌炎組（VMC組）血漿外泌體中的差異蛋白質(zhì)組，篩選可能與VMC早期診斷密切相關(guān)的蛋白標(biāo)志物。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，VMC組與Control組血漿外泌體蛋白組相比較，共篩選出10個差異蛋白點(diǎn)，包括8個上調(diào)蛋白點(diǎn)，2個下調(diào)蛋白點(diǎn)。經(jīng)質(zhì)譜鑒定后，表達(dá)上調(diào)的蛋白包括角蛋白2（KRT2）、角蛋白5（KRT5）、角蛋白9（KRT9）、角蛋白77（KRT77）、角蛋白78（KRT78）、鋅-α2糖蛋白（AZGP1）、觸珠蛋白（HP）和視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）；表達(dá)下調(diào)的蛋白是CD5抗原樣蛋白（CD5L）和補(bǔ)體C1q亞基B（C1QB）。選取RBP4進(jìn)行ELISA驗證，結(jié)果表明，與Control組[（64.5±2.6）μg/L]相比較，VMC組[（148.7±3.9）μg/L]血漿外泌體中RBP4特異性表達(dá)上調(diào)（P<0.05），與DIGE結(jié)果一致。(生物谷世聯(lián)博研Bioexcellence）

小編推薦會議  2020（第五屆）外泌體與疾病研討會

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