朊病毒病是一類由朊病毒引起的致死性神經(jīng)退行性疾病,又稱為傳染性海綿狀腦病(transmissible spongeform
encephaiopathies,TSEs)。人類朊病毒病主要包括克-雅病(creutzfeldt-jakob
disease,CJD)、庫魯病(kuru)、吉斯特曼-施特勞斯綜合征(gerstmann-str ussler-scheinker
syndrom,GSS)、致死性家族型失眠癥(fatal familial insomnia,
FFI)等。動物朊病毒病包括羊瘙癢病(scrapie)、傳染性水貂腦病(transmissible mink
encephalopathy,TME)、麋鹿和騾鹿慢性消耗病(chronic wasting disease,CWD)和牛海綿狀腦病(bovine
spongiform
encephalopathy,BSE)等。目前認(rèn)為,朊病毒病是由正常細(xì)胞型朊蛋白(PrPC)構(gòu)象發(fā)生改變,形成了具有感染性、部分蛋白酶K抗性和去污劑不可溶性的朊病毒(PrPSc)。感染朊病毒Chandler毒株的小鼠神經(jīng)瘤細(xì)胞系SMB-S15是一種可觀察到朊病毒的持續(xù)復(fù)制,但不影響細(xì)胞生長和分裂的細(xì)胞模型,經(jīng)硫酸戊糖(pentosane
sulfate,PS)處理后可清除PrPSc;經(jīng)白藜蘆醇(resveratrol,RES)處理后可有效抑制PrPSc的體外復(fù)制,并消除其在體內(nèi)的感染力。
、
為了利用朊病毒感染細(xì)胞模型,探索朊病毒清除過程中外泌體內(nèi)蛋白的差異表達(dá),中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所謝姆斯耶·吾拉音、石強、高晨等利用同位素標(biāo)記相對與絕對定量(isobaric
tags for relative and absolute quantitation,
iTRAQ)技術(shù),分別從朊病毒感染細(xì)胞系SMB-S15、對照細(xì)胞系SMB-PS以及暴露于白藜蘆醇4 d(RES4)和8
d(RES8)的SMB-S15細(xì)胞中提取外泌體,并對這些提取的外泌體中蛋白進行蛋白質(zhì)組學(xué)分析。
結(jié)果發(fā)現(xiàn):從4種細(xì)胞來源的外泌體中總計檢出4 809種蛋白質(zhì),隨著朊病毒的清除,外泌體中蛋白質(zhì)變化多樣,其中下調(diào)蛋白略多于上調(diào)蛋白??赡苌婕暗闹匾钒ㄅ两鹕C合癥、阿爾茲海默癥和亨廷頓病等神經(jīng)退行性疾病相關(guān)通路。
本研究發(fā)現(xiàn)在用白藜蘆醇和硫酸戊糖清除朊病毒過程中,隨著朊病毒的清除,細(xì)胞間外泌體中蛋白質(zhì)隨之發(fā)生變化,提示外泌體可能參與朊病毒在細(xì)胞間的傳遞。(世聯(lián)博研(Bioexcellence)世聯(lián)博研Bioexcellence)
小編推薦會議
2020(第五屆)外泌體與疾病研討會
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