為了觀察肝癌干細(xì)胞外泌體對肝癌細(xì)胞增殖和耐藥性的影響,吉林醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院白金權(quán)、李柏文等使用流熒光細(xì)胞技術(shù)篩選人肝癌細(xì)胞株MHCC97干細(xì)胞,超速離心提取干細(xì)胞外泌體.MTT和軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖情況;MTT法檢測細(xì)胞對化療藥物的敏感程度,實(shí)時熒光定量RT-PCR和Western Blot檢測細(xì)胞增殖和耐藥相關(guān)基因和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果表明, 實(shí)驗(yàn)肝癌細(xì)胞各時間點(diǎn)OD值要明顯高于對照組和普通組(P<0.05),實(shí)驗(yàn)組肝癌細(xì)胞對5-氟尿嘧啶和阿霉素的半數(shù)抑制濃度明顯高于對照組和普通組(P<0.05)。RT-PCR和Western blot結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組肝癌干細(xì)胞外泌體中survivin、c-myc、ras、ABCG2、MDR-1、MRP-1基因mRNA和蛋白的表達(dá)均較對照組的普通肝癌細(xì)胞明顯增強(qiáng),而P53和PTEN的表達(dá)則較對照組明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
這個研究表明,肝癌干細(xì)胞外泌體能促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞對化療藥物的耐藥,其機(jī)制可能通過調(diào)控細(xì)胞增殖和耐藥相關(guān)基因蛋白表達(dá)來實(shí)現(xiàn)。(生物谷世聯(lián)博研Bioexcellence)
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