UniQure于去年12月中旬提交一份初步診斷為肝細(xì)胞癌(HCC)的相關(guān)嚴(yán)重不良事件安全報(bào)告指出，有1名患者于2019年10月接受了新型基因療法dezaparvovec(AMT-061)，在腹部超音波檢查中發(fā)現(xiàn)肝臟腫塊。

目前美國(guó)FDA已暫停該公司其他三項(xiàng)血友病臨床試驗(yàn)。美國(guó)FDA指出，病毒載體AAV曾在小鼠研究中誘發(fā)癌癥，AAV載體的DNA通常會(huì)在細(xì)胞核中形成一個(gè)環(huán)，在新生小鼠的研究中顯示，AAV有時(shí)會(huì)引起肝癌。

在去年，幾只接受AAV血友病基因治療實(shí)驗(yàn)狗的染色體中帶有外源DNA，并觸發(fā)了細(xì)胞不正常的生長(zhǎng)，但這些實(shí)驗(yàn)狗在接受基因治療的幾年后，也沒有發(fā)展出腫瘤。

 UniQure公司稱將進(jìn)一步調(diào)查是否是AAV病毒本身導(dǎo)致的患者癌癥。UniQure指出，該名患者年齡較高，且在進(jìn)行基因治療前，已具有25年的乙肝、丙肝及非酒精性脂肪肝炎病史，可能增加該名患者罹患肝細(xì)胞癌的風(fēng)險(xiǎn)。

2021年3月， UniQure公司得出的結(jié)論是，在臨床試驗(yàn)中，廣泛用于基因治療的AAV病毒不太可能導(dǎo)致血友病患者患上肝癌。UniQure對(duì)患者腫瘤細(xì)胞的測(cè)試顯示，AAV只在一小部分(0.027%)細(xì)胞中插入到基因組中，而且當(dāng)它插入時(shí)，它落在隨機(jī)分散的點(diǎn)上。如果AAV觸發(fā)單個(gè)細(xì)胞失控生長(zhǎng)，那么病毒DNA就會(huì)在許多腫瘤細(xì)胞的相同部位出現(xiàn)。

“該患者的腫瘤細(xì)胞也有幾個(gè)已知的癌癥突變，以及肝癌的危險(xiǎn)因素，包括長(zhǎng)期的乙肝和丙肝感染?！辟M(fèi)城兒童醫(yī)院的血友病基因治療研究員Denise Sabatino表示，這些發(fā)現(xiàn) “支持了AAV整合事件不可能對(duì)肝臟腫瘤負(fù)責(zé)的結(jié)論。”

長(zhǎng)期以來，腺相關(guān)病毒載體（AAV）由于具有長(zhǎng)期潛伏于人體而不表現(xiàn)出任何明顯致病性的優(yōu)點(diǎn)被公認(rèn)是目前最理想的基因治療基因載體。血友病B患者由于編碼FIX的基因出現(xiàn)突變，導(dǎo)致FIX缺失或缺陷。

UniQure公司開發(fā)的基因療法etranacogene dezaparvovec旨在使用AAV5載體遞送表達(dá)FIX Padua變體的轉(zhuǎn)基因。這種FIX變體具有更高的FIX活性，意味著可以在更低的表達(dá)水平完成正常凝血功能。

該公司在2020年12月第62屆美國(guó)血液學(xué)會(huì)（ASH）年會(huì)上公布了其治療血友病B的在研基因療法AMT-061（etranacogene dezaparvovec）在HOPE-B的關(guān)鍵性3期臨床試驗(yàn)中的最新數(shù)據(jù)。

AMT-061是一款基于腺相關(guān)病毒5（AAV-5）的基因療法，用于治療B型血友病，是由一個(gè)攜帶野生型FIX基因的基因盒的AAV5載體組成。AMT-061是第二代B型血友病基因療法，其基因盒中含有一個(gè)受專利保護(hù)的FIX Padua變體（FIX-Padua），F(xiàn)IX-Padua是FIX的變體，活性是天然FIX的6-7倍。使用時(shí)直接靜脈注射即可，也無(wú)需類固醇藥物的預(yù)防性使用，靶向肝臟，進(jìn)入肝細(xì)胞后，采用肝臟特異的啟動(dòng)子，穩(wěn)定分泌FIX-Padua這個(gè)變體，增強(qiáng)血友病B患者的凝血功能。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，在接受治療26周后，這一基因療法將患者體內(nèi)凝血因子IX（FIX）活性水平從基線的2%以下提高到37.2%，達(dá)到了研究的第一個(gè)主要終點(diǎn)。

UniQure公司計(jì)劃在2021年下半年向美國(guó)FDA和歐盟EMA遞交監(jiān)管申請(qǐng)。該基因療法已經(jīng)在血友病B的試驗(yàn)中，希望可以提供一種有效治愈該病的一勞永逸的方法。

然而，近年來不斷警示呼聲稱，這一看似安全的療法或許存在著致命的風(fēng)險(xiǎn)。

2020年11月，Nature Biotechnology發(fā)表了一篇題研究論文，研究顯示針對(duì)10年前用AAV治療的血友病犬的研究表明，該載體很容易將其有效載荷插入宿主DNA中控制細(xì)胞生長(zhǎng)的基因附近，有誘發(fā)癌癥的可能性。

腺相關(guān)病毒（adeno-associated virus，AAV）是目前發(fā)現(xiàn)的一類結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的單鏈DNA缺陷型病毒。而重組腺相關(guān)病毒載體（rAAV）源于非致病的野生型腺相關(guān)病毒，具有安全性好、宿主細(xì)胞范圍廣和在體內(nèi)表達(dá)時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)， 目前的科學(xué)界共識(shí)是AAV不會(huì)導(dǎo)致任何人類疾病，因此成為目前最有前景的基因治療載體。

AAV基因療法通過AAV病毒將治療性基因輸送到特定的組織和器官中，這些治療性基因在這些非分裂細(xì)胞中以游離體形式穩(wěn)定存在并表達(dá)，從而有效治療單基因遺傳病，例如血友病、家族性漸凍癥等。

而在2015年法國(guó)巴黎大學(xué)研究人員發(fā)表在Nature Genetics雜志上的一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn)，一種與肝癌有關(guān)的病毒--2型腺相關(guān)病毒（AAV2），研究結(jié)果提示AAV2在這些患者中具有致病作用。

研究人員為了鑒定肝細(xì)胞癌的風(fēng)險(xiǎn)因子，研究人員對(duì)193名肝細(xì)胞癌患者進(jìn)行了研究，分析了他們腫瘤細(xì)胞的基因組。研究顯示，有11名患者的基因組中插入了2型腺相關(guān)病毒（AAV2）的DNA片段。

與正常細(xì)胞相比，腫瘤細(xì)胞中的病毒DNA整合要頻繁得多。在193個(gè)HCC中的11個(gè)中發(fā)現(xiàn)了腺相關(guān)病毒2型（AAV2）的克隆整合。這些AAV2整合發(fā)生在已知的癌癥驅(qū)動(dòng)基因中，即CCNA2（細(xì)胞周期蛋白A2；4例），TERT（端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶；1例），CCNE1（細(xì)胞周期蛋白E1；3例），TNFSF10（腫瘤壞死因子超家族成員10；2例） ）和KMT2B（賴氨酸特異性甲基轉(zhuǎn)移酶2B；一種情況）導(dǎo)致靶基因過表達(dá)。

值得注意的是，這11名患者中有8名不存在肝硬化，6名不存在已知的肝癌風(fēng)險(xiǎn)因子。進(jìn)一步研究表明，病毒DNA插入患者基因組之后，影響了細(xì)胞增殖的重要基因。研究人員指出，AAV2會(huì)使這些基因過度表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤發(fā)展。過去被認(rèn)為無(wú)害的AAV2實(shí)際上與肝細(xì)胞癌有關(guān)，如果患者沒有表現(xiàn)出肝硬化和其它肝癌風(fēng)險(xiǎn)因子，那么它們的病情很可能與AAV2有關(guān)。

研究人員指出，AAV2現(xiàn)在常被用作基因治療的載體。雖然AAV2 DNA插入引發(fā)癌癥可能比較少見，但在在使用這種病毒的時(shí)候應(yīng)該充分提高警惕。

因此，有必要對(duì)接受AAV載體治療的患者開展進(jìn)一步研究和長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)，以確定AAV是否會(huì)在極少數(shù)情況下導(dǎo)致癌癥。

小編推薦會(huì)議  2021基因治療與核酸藥物開發(fā)高峰論壇

http://meeting.世聯(lián)博研Bioexcellence/2021Gene