近日，在2020年第62屆美國血液學(xué)會年會(ASH)上，來自賓夕法尼亞大學(xué)的科學(xué)家們展示了他們最新的臨床前研究結(jié)果，他們發(fā)現(xiàn)，利用CRISPR/Cas9技術(shù)敲除CAR-T細(xì)胞上能抑制T細(xì)胞激活的特殊蛋白或能增強(qiáng)工程化T細(xì)胞清除血液癌癥的能力。研究人員敲除了CAR-T細(xì)胞上名為CD5的基因，隨后將其輸注回攜帶T細(xì)胞和B細(xì)胞白血病/淋巴瘤的小鼠體內(nèi)，CD5基因能編碼T細(xì)胞表面的CD5蛋白，而且還會抑制其激活。相比輸注了非編輯CAR-T細(xì)胞的小鼠而言，輸注了CD5被剔除的CAR-T細(xì)胞的小鼠機(jī)體外周血中的T細(xì)胞增殖水平較高，而且腫瘤尺寸發(fā)生了明顯下降，且小鼠有更好的生存結(jié)局。

CRISPR技術(shù)能幫助科學(xué)家們鎖定并編輯任何不需要的基因，以癌癥為例，該技術(shù)就能通過剔除T細(xì)胞中的特殊基因來幫其更好地抵御腫瘤，這種方法與CAR-T細(xì)胞療法密切相關(guān)，即研究人員通過收集患者機(jī)體自身的T細(xì)胞，對其進(jìn)行工程化修飾表達(dá)新型受體從而尋找并攻擊癌細(xì)胞。醫(yī)學(xué)博士Marco Ruella說道，我們通過研究首次表明，我們可以成功利用CRISPR/Cas9技術(shù)來敲除CAR-T細(xì)胞表面的CD5，從而增強(qiáng)其攻擊癌癥的能力，在多種癌癥模型中，編輯和非編輯CAR-T細(xì)胞之間的差異非常驚人。

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研究人員首次在T細(xì)胞白血病模型中檢測了這種新方法，抗CD5的CAR-T細(xì)胞能被遺傳工程化修飾來尋找惡性T細(xì)胞上的CD5并對其發(fā)起攻擊；由于CD5在正常T細(xì)胞中也會表達(dá)，隨后研究人員從CAR-T細(xì)胞對CD5進(jìn)行了移除，這樣就能避免對其它CAR-T細(xì)胞的殺滅效應(yīng)，從而就能潛在釋放CAR-T細(xì)胞的激活，否則就會被這些細(xì)胞上CD5的存在所抑制。

實際上，在體內(nèi)和體外實驗中，CD5被剔除的抗CD5 CAR-T細(xì)胞要比CD5沒有被剔除的CAR-T細(xì)胞的效力更強(qiáng)，而且有超過50%的小鼠在長期的實驗中得到了治愈。為了檢測CD5的剔除是否會增加靶向作用抗原而不是CD5的CAR-T細(xì)胞的抗腫瘤效應(yīng)，隨后研究人員在CTL019 CAR-T細(xì)胞對抗CD19+ B細(xì)胞白血病的環(huán)境下進(jìn)行了證實，值得注意的是，同樣在該模型中，CD5的敲除會明顯增強(qiáng)CTL019 CAR-T細(xì)胞的抗腫瘤效率，同時還會讓大部分小鼠的疾病完全緩解期延長。

在報告會當(dāng)天的另一項演講中，研究人員回顧了對8000多份患者腫瘤活組織樣本的基因組數(shù)據(jù)分析結(jié)果，其研究了這些樣本中CD5的水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其與患者的預(yù)后密切相關(guān)，在大多數(shù)癌細(xì)胞類型中，T細(xì)胞中表達(dá)的CD5越少，患者的預(yù)后越好，因此機(jī)體T細(xì)胞中CD5的水平就顯得尤為重要了。相關(guān)研究結(jié)果有望幫助科學(xué)家們后期進(jìn)行相關(guān)的臨床試驗來探索如何將CAR-T細(xì)胞療法與CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)相結(jié)合來改善當(dāng)前以及開發(fā)新型的細(xì)胞療法。

諸如研究人員開發(fā)的新型CAR-T細(xì)胞療法或能用于兒童和成人血液癌癥患者，同時也能在復(fù)發(fā)或難治性B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病或非霍奇金淋巴瘤患者機(jī)體中誘發(fā)出戲劇性的反應(yīng)。然而，很多患者并不會產(chǎn)生反應(yīng)或者最終會出現(xiàn)疾病復(fù)發(fā)的情況。更重要的是，CAR-T細(xì)胞療法并不能在多種血液惡性腫瘤的治療中發(fā)揮有效的作用，比如T細(xì)胞淋巴瘤和白血病等，因為血液癌癥會頻繁表達(dá)CD5。CD5會在大部分慢性淋巴細(xì)胞白血病和套細(xì)胞淋巴瘤患者機(jī)體中表達(dá)，而且還會在大約20%的急性髓性白血病患者機(jī)體中表達(dá)。

目前能增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞療法的很多方法都涉及到能解決T細(xì)胞耗竭的療法，尤其是PD-L1/PD-1軸。而發(fā)表此次演講的研究人員的策略卻并不同，其目標(biāo)在于在T細(xì)胞激活早期階段進(jìn)行干預(yù)，從而提供機(jī)會來增加腫瘤微環(huán)境中T細(xì)胞的功能。研究者Carl June說道，從長遠(yuǎn)來看，這或許代表了一種更為普遍的策略，從而會增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞的抗腫瘤效應(yīng)；我們期待在下一階段的工作中以這些令人鼓舞的發(fā)現(xiàn)為基礎(chǔ)進(jìn)行更為深入的研究。最后研究者表示，調(diào)查CD5剔除的CAR-T細(xì)胞療法的1期臨床試驗將會與2021年早些時候開始。（生物谷Bioon.com）

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