本文來(lái)自Nat Chem Biol，通訊作者Prof. James A Wells， University of California， San Francisco. 這篇文章在Nat Chem Biol上發(fā)表，蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定酶連接位點(diǎn)策略優(yōu)化肽連接酶特異性。作者報(bào)道了一種新穎的基于人類抗體的化學(xué)誘導(dǎo)二聚化策略，并將該策略成功應(yīng)用與細(xì)胞免疫治療的過(guò)程中。

化學(xué)誘導(dǎo)二聚化(chemically induced dimerizers， CIDs)是一個(gè)廣泛使用的外源調(diào)控信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程的策略，目前最熱門的應(yīng)用便是chimeric antigen receptor T-cell (CAR T-cell) 免疫治療法，臨床上可以有效治療白血病。在自然界中，最經(jīng)典的例子便是FKBP-FRB CID體系，但所使用的rapamycin具有很強(qiáng)的毒性和免疫抑制性。基于目前應(yīng)用的一些限制，作者試圖開發(fā)新的CID體系，期望實(shí)現(xiàn)外源更好的調(diào)控，進(jìn)行細(xì)胞免疫治療。

作者首先師法于自然，F(xiàn)KBP-FRB CID體系中rapamycin 和FKBP12結(jié)合后會(huì)產(chǎn)生新的結(jié)合表面，而且小分子的大部分處于表面，然后FRB識(shí)別并特異性結(jié)合該復(fù)合物。因此作者對(duì)PBD中所有結(jié)合小分子的蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析后，發(fā)現(xiàn)人BCL-xL-ABT-737是一個(gè)非常合適的復(fù)合物，小分子暴露于結(jié)合表面。然后作者利用噬菌體篩選技術(shù)對(duì) 該結(jié)合區(qū)域特異性識(shí)別的抗體進(jìn)行篩選，得到的抗體只能識(shí)別并有效結(jié)合在BCL-xL-ABT-737復(fù)合物的小分子結(jié)合位點(diǎn)附近。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)反復(fù)驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)最終得到的抗體AZ1具有非常高的特異性和結(jié)合能力，因此作者將該體系進(jìn)行了細(xì)胞治療的應(yīng)用，包括調(diào)控基因的表達(dá)和激活免疫細(xì)胞。作者分別將該體系和CRISPRa和CAR-T技術(shù)相結(jié)合，當(dāng)加入外源小分子ABT-737時(shí)，CRISPRa體系可以迅速激活下游基因，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)調(diào)控；在T細(xì)胞上連接BCL-xL蛋白質(zhì)，加入小分子ABT-737后，可以是T細(xì)胞靶向連接有AZ1的癌細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)選擇性殺死。最后作者證明了該小分子使用濃度均為nM級(jí)別，遠(yuǎn)低于其誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的濃度，因此具有廣泛的應(yīng)用。總之，作者在本文中對(duì)CID體系進(jìn)行了進(jìn)一步拓展，結(jié)合了抗體的特異性識(shí)別結(jié)合能力，并將該技術(shù)成功應(yīng)用于了細(xì)胞治療過(guò)程中，具有很好的應(yīng)用前景。(生物谷Bioon.com）